Тиогликолевая микробиологическая питательная среда

Тиогликолевая среда - используют для контроля стерильности различных биоматериалов, а также для культивирования широкого круга аэробных и анаэробных бактерий.

Приготовление

Размешать 30 г порошка в 1 литре дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения частиц.

Для полного освобождения от всех видов микроорганизмов нужно стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

Остудить до 25°С и оставить для хранения в темном прохладном месте (при температуре ниже 25°С).

Примечание: если более, чем треть среды сверху стала розового цвета, ее можно один раз восстановить, прогрев в кипящей водяной бане или струе пара до исчезновения розовой окраски.

Принцип и оценка результата

Эту среду предложил Бревер ^[1] для быстрого культивирования аэробов, а также анаэробов (ввиду добавления редуцирующего вещества и небольшого количества агар-агара). Американские специалисты ^[2]^[3] рекомендовали указанные среды для тестов на стерильность антибиотиков, биоматериала, пищевых продуктов, а также для определения фенолового коэффициента и спороцидных свойств дезинфектантов. Вместе с тем, среды предназначены для исследования прозрачных жидкостей и водорастворимых материалов.

Глюкоза, гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, мясной экстракт и L-цистин дают питательные вещества для размножения бактерий. Тиогликолят натрия снижает окислительно-восстановительный потенциал, а также нейтрализует бактериостатический эффект соединений ртути и других тяжелых металлов, находящихся в исследуемом материале. Любое повышение концентрации кислорода сопровождается изменением цвета специального индикатора редокс-потенциала (резазурина) на красный. Низкий редокс-потенциал помогает поддерживать небольшое количество агара в среде.

Рост штаммов

Рост штаммов через 48-72 часов при 35°С - обильный. Символом * отмечены культуры, которые можно инкубировать при 25-30°С в течение 2-7 дней.

Bacillus subtilis*

Candida albicans*

Clostridium sporogenes*

Micrococcus luteus*

Bacteroides vulgatus* (сравнительно замедленный рост)

Neisseria meningitidis

Streptococcus pyogenes

Исследование биоматериалов на стерильность

Для контроля стерильности лекарственных средств применяют тиогликолевую среду (или жидкую среду Сабуро).

Исследуемый препарат в количестве 1 мл засевают на вышеуказанные среды 1:4 (Метод прямого посева). При испытании лекарственных средств посевы в тиогликолевой среде ингибируют при температуре 37°С, а в среде Сабуро - 22°С.

Посевы просматривают ежедневно и по окончании периода инкубации. Наличие роста микроорганизмов в питательных средах оценивают визуально по появлению мутности, пленки, осадка и других микроскопических изменений. Выявленный рост микроорганизмов необходимо подтвердить микроскопированием мазков, окрашенных по Граму. Испытуемый препарат считают удовлетворяющим требованиям испытания на стерильность при отсутствии роста микроорганизмов.

См. также

Примечания

↑ Brewer, 1940, J. Am. Med. Assoc., 115:598.
↑ U. S. Pharmacopeia, 2002, USP 25/NF 20, Asian Edition, United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.
↑ Cunniff P. (Ed.), 1995, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th ed., AOAC, Washington, D.C.

[1] Brewer, 1940, J. Am. Med. Assoc., 115:598.

[2] U. S. Pharmacopeia, 2002, USP 25/NF 20, Asian Edition, United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.

[3] Cunniff P. (Ed.), 1995, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th ed., AOAC, Washington, D.C.

[1]

[2]

[3]